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總膽固醇(T-CHO)試劑盒樣本處理注意事項

更新時間:2020-03-06      瀏覽次數(shù):1908

總膽固醇(T-CHO)試劑盒樣本處理注意事項


血清總膽固醇(Total Cholesterol,TC)是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇的總和,包括游離膽固醇和膽固醇酯。人體的膽固醇除來自食物外,還可在體內(nèi)由乙酰輔酶A合成,成人肝臟和小腸可提供約90%的內(nèi)源性膽固醇。血清總膽固醇水平受年齡、家族、性別、遺傳、飲食、精神等多種因素的影響,男性高于女性,體力勞動者低于腦力勞動者。由于血清總膽固醇與動脈粥樣硬化、冠心病、腦卒中等心腦血管疾病關系密切,血清總膽固醇測定已成為血脂分析的常規(guī)項目。


本試劑盒采用 COD-PAP 法配制,用于體外測定總膽固醇含量。適用于各型酶標儀、半自動或 全自動生化分析儀。


 

樣本處理:

血清(漿):
直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。

培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清測定。

[注]:一般建議細胞密度在 100 萬個/ml 以上。

組織樣本:準確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9 倍體積的勻漿介 質(zhì),冰水浴條件下機械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清液待測。

[注]:
1、如組織樣本不存在高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進行提取。 
2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用無水乙醇進行提取。


總膽固醇(T-CHO)試劑盒樣本處理注意事項


細胞樣本:

A、細胞收集:將制備好的細胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;用等滲緩沖液(推薦 0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液)清洗 1~2 次,同樣 1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;

B、細胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的勻漿介質(zhì)(推薦 0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液或生理 鹽水)進行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率 300W,3~5 秒/次,間隔 30 秒,重復 3~5 次 ) 或手 動勻漿, 制 備好的勻 漿 液不離心 待 測。也可 采 用裂解液 裂 解 ( 推薦 TritonX-100,1~2%,裂解 30~40 分鐘),裂解好的液體不離心直接測定。 


注意事項:

 

1、本產(chǎn)品僅用于科研,不得用于臨床診斷,切勿服用。


2、樣品含量如超出檢測范圍上*,可用生理鹽水稀釋樣本后進行測定,測定結果乘以稀釋倍數(shù)。


3、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。


4、試劑與樣本量可按照全自動生化分析儀的要求,按照 1:100 的比例減。

 

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